一、柱子可以分為(wei) ：加壓，常壓，減壓

　　壓力可以增加淋洗劑的流動速度，減少產(chan) 品收集的時間，但是會(hui) 減低柱子的塔板數。所以其他條件相同的時候，常壓柱是效/率最高的，但是時間也最長，比如，天然化合物的分離，一個(ge) 柱子幾個(ge) 月也是有的。

　　減壓柱能夠減少矽膠的使用量，感覺能夠節省一半甚至更多，但是，由於(yu) 大量的空氣通過矽膠會(hui) 使溶劑揮發（有時在柱子外麵有水汽凝結），以及有些比較易分解的東(dong) 西可能得不到，而且還必須同時使用水泵抽氣（很大的噪音，而且時間長）。以前曾經大量的過減壓柱，對它有比較深厚的感情，但是自從(cong) 嚐試了加壓後，就幾乎再也沒動過減壓的念頭了。

　　加壓柱是一種比較好的方法，與(yu) 常壓柱類似，隻不過外加壓力使淋洗劑走的快些。壓力的提供可以是壓縮空氣，雙連球或者小氣泵（給魚缸供氣的就行）。特別是在容易分解的樣品的分離中適用。壓力不可過大，不然溶劑走的太快就會(hui) 減低分離效果。個(ge) 人覺得加壓柱在普通的有機化合物的分離中是比較適用的。

　　二、關(guan) 於(yu) 柱子的尺寸，應該是又粗又長的最好

　　柱子長了，相應塔板數就高。柱子粗了，上樣後樣品原點就小（反映在柱子上就是樣品層比較薄），這樣相對減小了分離難度。試想如果柱子10 cm，而樣品層隻有2 cm，那麽(me) 分離難度可想而知，恐怕要用很低極性溶劑慢慢衝(chong) 了。如果樣品層有0.5 cm，那麽(me) 各組分就比較容易得到分離了。當然采用粗大的柱子要犧牲比較多的矽膠和溶劑了，不過這些成本相對於(yu) 產(chan) 品來說也許就不算什麽(me) 了（溶劑回收重蒸後也可減小了部分浪費）。

　　現在常見的柱子徑高比一般為(wei) 1：5~10，矽膠量是樣品量的30～40倍，選擇時要具體(ti) 分析。如果所需組分和雜質比較容易分開（是指所需組分Rf在0.2～0.4，雜質相差0.1以上），就可以少用矽膠，用小柱子（例如200 mg樣品，用50px×500px柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，可以增加柱子直徑，比如用75px的，也可以減小淋洗劑極性等。關(guan) 於(yu) 無水無氧柱，適用於(yu) 對氧，水敏感，易分解的產(chan) 品。

　　可以濕柱，也可以幹柱。不過在樣品之前至少要用溶劑把柱子飽和一次，因為(wei) ，溶劑和矽膠飽和時放出的熱量有可能使產(chan) 品分解，畢竟要分離的是敏感的東(dong) 東(dong) ，小心不為(wei) 過。因為(wei) 分離的東(dong) 西比較敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。

　　三、關(guan) 於(yu) 濕法、幹法上樣

　　濕法省事，一般用淋洗劑溶解樣品，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等。但溶劑越少越好，不然溶劑就成了淋洗劑了。很多樣品在上柱前是粘乎乎的，一般沒關(guan) 係。可是有的上樣後在矽膠上又會(hui) 析出，一般都是比較大量的樣品才會(hui) 出現，是因為(wei) 矽膠對樣品的吸附飽和，而樣品本身又是比較好的固體(ti) 才會(hui) 發生，應該先重結晶，得到大部分的產(chan) 品後再柱分，如果不能重結晶那就不管它了，直接過就是了，樣品隨著淋洗劑流動會(hui) 溶解的。

　　有些樣品溶解性差，能溶解的溶劑又不能上柱（比如DMF，DMSO等，會(hui) 隨著溶劑一起走，顯色是一個(ge) 很長的脫尾），這時就必須用幹法上柱了。樣品和矽膠的量有一種說法是1：1，應該是越少越好，但是要保證在旋幹後，不能看到明顯的固體(ti) 顆粒（那說明有的樣品沒有吸附在矽膠上）。

　　四、溶劑的選擇

　　當然是最/便宜，最/安全，最/環保的了，所以大多選用石油醚，乙酸乙酯。文獻中有用正己烷的，太貴了，除非特別需要盡量不要用，不然銀子嘩嘩的，流的比淋洗劑還快，不過，因為(wei) 極性很小，有時還是非它不可。乙/醚也可以用，但是，就是容易睡覺，注意保持清醒別讓溶劑流幹了，那樣柱子也就不爽了。

　　二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和矽膠的吸附是一個(ge) 放熱過程，所以夏天的時候經常會(hui) 在柱子裏產(chan) 生氣泡，天氣冷的時候會(hui) 好一些。甲醇，據說能溶解部分矽膠，所以產(chan) 品如果想過元素分析的話要留神，應該經過後繼處理，比如，重結晶等。其他溶劑用的相對較少，要依不同需要選擇。

　　由於(yu) 某些原因，用到的淋洗劑多是大包裝的（便宜嘛），如用10 L或25 L塑料桶裝的，要注意這些工業(ye) 品的純度是較低的。經常能夠從(cong) 送來的大桶底部看見有色的雜質，其他雜質就可想而知了，所以在比較嚴(yan) 格的柱分時就要對溶劑重蒸。當然，過原料時就可以免去這一步了，反正下麵還有提純的方法。

　　另外，溶劑在過柱子後最好也回收使用，一方麵環保，另一方麵也能節省部分經費，缺點是要消耗一定的人工。這裏要注意的是，一般在過柱同時進行的是減壓旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由於(yu) 揮發度的不同會(hui) 導致/極性的變化，一般會(hui) 使得極性變大，在梯度淋洗時比較合適，正好極性越來越大了。在過完柱子後，溶劑最後回收要采用常壓，因為(wei) 在減壓旋蒸時會(hui) 有部分低沸點的雜質一起出來，常壓時就會(hui) 減少這種現象，如果雜質和你下麵要過的樣品有反應那就慘了。

　　五、關(guan) 於(yu) 操作問題

　　1.裝柱

　　柱子下麵的活塞一定不要塗潤滑劑，會(hui) 被淋洗劑帶到產(chan) 品中的，可以采用四氟節門的。幹法和濕法裝柱沒什麽(me) 區別，隻要能把柱子裝實就行。裝完的柱子應該要適度的緊密（太密了淋洗劑走的太慢），一定要均勻（不然樣品就會(hui) 從(cong) 一側(ce) 斜著下來）。書(shu) 中寫(xie) 的都是不能見到氣泡，其實在大多數情況下有些小氣泡沒太大的影響，一加壓氣泡就全下來了。當然如果你裝的柱子總是有氣泡就說明需要多練習(xi) 了。但是柱子更忌諱的是開裂，甭管豎的還是橫的，都會(hui) 影響分離效果，甚至作廢！

　　2.加樣

　　用少量溶劑溶樣品加樣，加完後將下麵的活塞打開，待溶劑層下降至石英砂麵時，再加少量低極性溶劑，然後再打開活塞，如此兩(liang) 三次，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗劑，一開始不要加壓，等溶樣品的溶劑和樣品層有一段距離（2～100px就夠了），再加壓，這樣避免了溶劑（如二氯甲烷等）夾帶樣品快速下行。

　　3.淋洗劑的選擇

　　感覺上要使所需點在Rf0.2~0.3左右的比較好。不要認為(wei) 在板上爬高了分的比較開，過柱子就用那種極性，如果Rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分開，因為(wei) 柱子是一個(ge) 多次爬板的狀態。

　　可以通過公式的比較：0.6/0.8一次的分離度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。

　　4.樣品的收集

　　用矽膠作固定相過柱子的原理是一個(ge) 吸附與(yu) 解吸的平衡，所以，如果樣品與(yu) 矽膠的吸附比較強的話，就不容易流出。這樣就會(hui) 發生，後麵的點先出，而前麵的點後出。這時可以采用氧化鋁作固定相。

　　另外，收集的試管大小要以樣品量而定，特別是小量樣品，如果用大試管，可能一根就收到了三個(ge) 樣品。嗚嗚，如果都用小試管那工作量又太大。

　　5.最後的處理

　　柱分後的產(chan) 品，由於(yu) 使用了大量的溶劑，其中的雜質也會(hui) 累積到產(chan) 品中，所以，如果想送分析，最好用少量的溶劑洗滌一下，因為(wei) ，大部分雜質溶在溶劑裏，一洗基本就沒了，必要時進行重結晶。