細胞培養(yang) 板緊密貼合的孔蓋，可有效防止細胞培養(yang) 過程中培養(yang) 基的汙染與(yu) 蒸發的損耗。

　　細胞培養(yang) 板在進行細胞操作時同樣遵循嚴(yan) 格無菌的原則，各項操作要保證規範、科學，不對細胞的生長造成額外的影響。這其中最常見的問題就是如何保證加樣後細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態的影響。

　　24孔培養(yang) 板或培養(yang) 皿的蓋子都很鬆，這樣是方便了透氣，但是細菌、黴菌等汙染物會(hui) 不會(hui) 也隨著溜進去呢？

　　蓋子很鬆，屬於(yu) 半開放培養(yang) ，這樣的目的是透氣（實際上是為(wei) 了使培養(yang) 皿外的CO2能夠與(yu) 培養(yang) 皿充分交換，維持培養(yang) 基的pH值）。

　　凡事有利必有弊，這樣當然增加了汙染的可能性。此外這樣還會(hui) 使培養(yang) 皿內(nei) 的液體(ti) 蒸發，這對於(yu) 精確定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養(yang) 箱內(nei) 空氣必須清潔（定期紫外線照，酒精擦洗，盡量少開關(guan) 培養(yang) 箱）b培養(yang) 箱內(nei) 的濕度必須始終保持為(wei) 100%（培養(yang) 箱內(nei) 放置無菌蒸餾水的水槽）。

　　就好像培養(yang) 皿，也是一個(ge) 蓋倒扣的容器，也不會(hui) 汙染。主要是因為(wei) 蓋子“L"型邊緣產(chan) 生氣流負壓的緣故，灰塵上麵才附著有微生物，而氣流攜帶的灰塵是無法通過產(chan) 生負壓的蓋邊緣的。而透氣作用隻是通過空氣的擴散，不會(hui) 產(chan) 生氣流，所以隻會(hui) 透氣不會(hui) 透菌。

　　培養(yang) 過細胞的人都知道，細胞如何的嬌貴，日複一日精心地嗬護，一個(ge) 不慎就全軍(jun) 覆沒。細胞培養(yang) ，從(cong) 來就不是一個(ge) 容易的過程。那麽(me) 關(guan) 於(yu) 細胞培養(yang) 的基本知識你又了解多少呢？

　　首先，操作前準備工作：

　　1、玻璃吸管和玻璃培養(yang) 瓶的消毒：1)高壓蒸汽滅菌15分鍾以上；2)幹烤消毒140度2小時以上；

　　2、無菌工作台先清洗後用75%酒精擦拭幹淨，紫外線照射40分鍾以上；各種培養(yang) 板照射3小時以上；

　　3、培養(yang) 基(pH7.2)和血清配製好後要做無菌試驗:將血清按10%加入培養(yang) 基內(nei) ，用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取培養(yang) 基5-10ml置培養(yang) 箱內(nei) 培養(yang) 2-3天，肉眼見無渾濁或沉澱等異物。分裝後置-20度保存；

　　4、消化液(pH7.8)或其它加入液，應用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌，分裝成支置-20度保存；

　　5、各種凍存的液體(ti) 複溫時應邊搖邊融化，否則有的液體(ti) (特別是培養(yang) 基)容易產(chan) 生沉澱；

　　6、培養(yang) 箱應先用清水清洗後用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應照射1小時以上，如有高溫滅菌的應按程序來菌)。至少每月一次；

　　7、進入操作時應注意先清洗雙手及手腕，然後用75%酒精擦拭，操作時注意無菌台內(nei) 空間層次；手及物品不要在暴露的瓶口上方來往，如果數量較多，培養(yang) 瓶應放在與(yu) 酒精燈平行地方便於(yu) 操作，瓶與(yu) 瓶之間應相隔一定的距離，開瓶(蓋)時應先用75%酒精反複擦拭或用燈燒，開開後應用燈先燒口，然後燒蓋。用完後同樣操作。整個(ge) 操作過程盡量在無菌台靠裏麵一點。