緩衝溶液在實驗中起到的作用
更新時間:2023-01-05 瀏覽次數:1027
緩衝(chong) 液是一種能在加入少量酸或堿時抵抗pH改變的溶液.PH緩衝(chong) 係統對維持生物的正常pH值,正常生理環境起重要作用.多數細胞僅(jin) 能在很窄的pH範圍內(nei) 進行活動,而且需要有緩衝(chong) 體(ti) 係來抵抗在代謝過程中出現的pH變化.在生物體(ti) 中有三種主要的pH緩衝(chong) 體(ti) 係,它們(men) 時蛋白質、重碳酸鹽緩衝(chong) 體(ti) 係.每種緩衝(chong) 體(ti) 係所占的分量在各類細胞和器官中是不同的.
在生化研究工作中,常常要用到緩衝(chong) 溶液來維持實驗體(ti) 係的酸堿度.研究工作的溶液體(ti) 係pH值的變化往往直接影響到我們(men) 工作的成效.如果提取酶實驗體(ti) 係的pH值變化或變化過大,會(hui) 使酶活性下降甚至wan全失活.所以我們(men) 要學會(hui) 配製緩衝(chong) 溶液.
由弱酸及其鹽組合一起使具有緩衝(chong) 作用.生化實驗室常常用的緩衝(chong) 係主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴bi妥酸、Tiris(三羥甲基氨基甲烷)等係統,在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩衝(chong) 體(ti) 係,因為(wei) 有時影響實驗結果的因素並不是緩衝(chong) 液的pH值,而是緩衝(chong) 液中的某種離子.如硼/酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩衝(chong) 劑都可能產(chan) 生不需要的反應.
硼/酸鹽:硼/酸鹽與(yu) 許多化合物形成複鹽、如蔗糖.
檸檬酸鹽:檸檬酸鹽離子容易與(yu) 鈣結合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用.
磷酸鹽:在有些實驗,它是酶的抑止劑或甚至是一個(ge) 代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從(cong) 溶液中沉澱出來.而且它在pH7.5以上時緩衝(chong) 能力很小.
三羥甲基氨基甲烷:它可以和重金屬一起作用,但在有些係統中也起抑止的作用.其主要缺點時溫度效應.這點往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris一緩衝(chong) 液,在4℃時是8.4,在37℃時是7.4,因此,4℃配製的緩衝(chong) 液拿到37℃測量時,其氫離子濃度就增加了10倍.而且它在pH7.5以下,緩衝(chong) 能力很差.
- (上一篇):默克色譜試劑與色譜純試劑之間到底有何區別呢
- (下一篇):默克卡爾費休試劑的防護與應用