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高效液相色譜出現雙峰的原因

更新時間:2023-06-09 瀏覽次數:1723

明明實驗時隻分析一種物質,為(wei) 什麽(me) 峰圖會(hui) 出現雙峰呢?通常情況下,正確的峰型應該是尖銳而對稱的,出現雙峰應該是實驗過程中有錯誤的步驟導致的。液相色譜出現“雙峰"的原因有很多。一般有以下幾種原因:色譜柱、溶劑、進樣量、樣品特性和pH值。恒譜生簡單介紹其中色譜柱、溶劑因素導致出現雙峰及解決(jue) 辦法。

賽默飛色譜柱使用注意事項(1)

色譜柱:

如何判斷是色譜柱出現問題導致雙峰出現呢?操作人員分析單一純物時,如果每個(ge) 色譜峰都出現雙峰,可以確定是色譜柱頭受損或者是柱頭汙染了。如果是色譜柱正常,進樣量少並且色譜峰形為(wei) 一大峰帶一小峰,不一定拖尾,這種情況可能是柱頭受堵。可以將色譜柱反過來接,用流動相或其它溶劑衝(chong) 洗掉堵在柱頭的殘留物,然後再反過來,一般都能解決(jue) 。如果反複還是不能解決(jue) 問題,可能是柱頭塌陷的問題。液相色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上,但是柱子使用一段時間後,可能有一些吸附作用強的物質保留於(yu) 柱頂造成柱頭塌陷,這時可補加填料使柱效恢複。每次使用完色譜柱後,需用洗脫能力強的洗脫液衝(chong) 洗,以延長色譜分析柱的壽命。

色譜柱頭塌陷的原因有很多,比較常見的是色譜泵壓力過高,填料壓碎產(chan) 生空隙。除此之外還有諸如裝填時壓力過低,不密實;流動相溶解填料,造成空隙;色譜柱入口篩板堵塞等原因。色譜篩板能有效地攔截樣品、流動相或管線及密封件的顆粒物對色譜柱的汙染,保護色譜柱和儀(yi) 器。篩板使用一段時間後,攔截的汙染物會(hui) 堵塞篩板,因此需要定期更換。但是相較於(yu) 損壞色譜柱,更換一個(ge) 篩板顯得性價(jia) 比更高,成本更低廉。

溶劑問題:

反相色譜流動相多為(wei) 甲醇、乙腈、水,實驗中往往會(hui) 從(cong) 中加各種添加劑以改善分離性能。有時候為(wei) 了樣品的溶解性或穩定性加入了一點的緩衝(chong) 液,但是緩衝(chong) 液的酸堿性可能會(hui) 導致樣品轉化,從(cong) 而產(chan) 生雙峰現象。可以更換緩衝(chong) 液或者更換流動相試一試。

影響雙峰出現的原因還有很多,比如樣品超過柱載量,從(cong) 而導致二次分配;儀(yi) 器間隔記錄時間太短都有可能造成雙峰出現,因此具體(ti) 情況要具體(ti) 分析。


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