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高效液相色譜中常見的峰形畸變

更新時間:2023-11-22 瀏覽次數:998

在使用液相色譜儀(yi) 時,經常會(hui) 出現峰形畸變的情況。接下來就讓我們(men) 一起來看看,如何才能避免峰形失真。

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當檢測器因樣品過載時會(hui) 出現平ding峰響應。在這種情況下,檢測器的靈敏度要高得多,並且會(hui) 飽和以產(chan) 生寬闊的平ding峰。一種選擇是衰減信號響應(不是實際的解決(jue) 方案),因為(wei) 其他峰的檢測也會(hui) 受到影響。更可行的選擇是降低樣品濃度或進樣量。

峰拖尾是由於(yu) 表麵矽烷醇基團電離為(wei) - Si-O - 提供陽離子交換位點而引起的常見失真。解決(jue) 方案在於(yu) 使用高純度級矽膠載體(ti) 以及推薦的 pH 值範圍 2-8。

緩衝(chong) 液控製添加劑的使用也限製了矽膠表麵上矽烷醇基團的電離。添加劑如(TFA)是一種離子配對劑,有助於(yu) 抑製電離。濃度範圍為(wei) 10-25 mM 的緩衝(chong) 液添加劑足以滿足大多數應用的需求。

通過過濾流動相溶劑、使用入口過濾器和更換泵密封件,在它們(men) 開始磨損和釋放垃圾顆粒之前,可以防止篩板堵塞或空隙形成。

低純度二氧化矽通常含有促進矽烷醇基團電離的金屬雜質。由於(yu) 與(yu) 固定相中的金屬離子螯合,使用高純度矽膠固定相有助於(yu) 拖尾。

與(yu) 峰拖尾相比,峰前移不太常見

通常由於(yu) 色譜柱內(nei) 的溝道而導致峰前移。最好更換色譜柱或以其他方式在推薦的 pH 範圍內(nei) 操作。

色譜柱過載也會(hui) 導致峰前移。使用稀釋樣品或減少進樣量。

流動相與(yu) 樣品的不相容性通常會(hui) 導致峰前移。將樣品溶解在流動相或其他兼容溶劑中

肩峰和分裂峰通常是由於(yu) 兩(liang) 種未分離的化合物的存在造成的。

減少樣品量或使用稀釋溶液通常可以解決(jue) 分裂問題

峰的分裂也是由玻璃料堵塞引起的。使用 20 – 30 ml 流動相的反向流動通常可以解決(jue) 峰分裂問題。

更換堵塞的篩板或保護柱

當由於(yu) 存在兩(liang) 種接近洗脫的化合物而導致分裂時,請在進樣前進行樣品淨化



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